高中生物知识点多,有不少内容需要记忆,下面是本站小编给大家带来的北京高二生物月季的花药培养知识点,希望对你有帮助。
高二生物月季的花药培养知识点
要点1 植物的花药培养的育种意义
育种工作者采用花药培养的方法,使花粉粒发育为单倍体植株,再经过人工诱导使染色体数目加倍,重新恢复到正常植株的染色体数目。这样的植株不仅能够正常生殖,而且每对染色体上的成对的基因都是纯合的,自交产生的后代不会产生性状分离。单倍体育种不仅缩短了育种周期,也为新品种的培育开辟了新途径。
要点2 被子植物的花粉发育
(1)被子植物的雄蕊通常包含花丝、花药两部分。花药为囊状结构,内部含有许多花粉。花粉是由花粉母细胞经过减数分裂而形成的。
(2)被子植物花粉的发育要经历四分体时期、单核期和双核期等阶段。
①在四分体时期,4个单倍体细胞连在一起。
②进入单核期时,四分体的4个单倍体细胞彼此分离,形成4个具有单细胞核的花粉粒。这时的细胞含浓厚的原生质,核位于细胞的中央(单核居中期)。随着细胞不断长大,细胞核由中央移向细胞一侧(单核靠边期)。
③进入双核期时,靠近细胞一侧的细胞核,分裂成1 个生殖细胞核和1个花粉管细胞核,进而形成两个细胞,一个是营养细胞,一个是生殖细胞。生殖细胞将再分裂一次,形成两个精子。
要点3 产生花粉植株的两种途径
通过花药培养产生花粉植株(即单倍体植株)一般有两种途径:
一种是花粉通过胚状体阶段分化发育成为植株;另一种是花粉在诱导培养基上先形成愈伤组织,将其诱导再分化成植株。
这两种途径之间并没有绝对的界限,主要取决于培养基中激素的种类及其浓度配比。
要点4 影响花药培养的因素
(1)不同植物的诱导成功率很不相同。
(2)就同一植物来说,亲本植株的生理状况对诱导成功率也有直接影响。
(3)花期早期时的花药比后期的更容易产生花粉植株。选择合适的花粉发育时期是提高诱导成功率的重要因素。
花粉发育的过程中,只有某一个时期对离体刺激敏感。一般来说,在单核期,细胞核由中央移向细胞一侧的时期,花药培养成功率最高。为了挑选到单核期的花药,通常选择完全未开放的花蕾。
(4)亲本植株的生长条件、材料的低温预处理以及接种密度等对诱导成功率都有一定影响。
要点5 实验操作
(1)材料的选取
要通过镜检来确定花药中的花粉是否处于适宜的发育期。
确定花粉发育时期的最常用方法有醋酸洋红法和焙花青铬矾法,焙花青铬矾法能将花粉细胞核染成蓝黑色。
(2)材料的消毒
先将花蕾用体积分数为70%的酒精浸泡大约30s→在无菌水中清洗→无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分→质量分数为0.1%的氯化汞溶液中2~4min→无菌水冲洗3~5次。
(3)接种和培养
①操作
灭菌后的花蕾,要在无菌条件下除去萼片和花瓣,并立即将花药接种到培养基上。
②操作注意事项
在剥离花药时,要尽量不损伤花药,因为花药受损后接种,容易从受伤部位产生愈伤组织;还要彻底去除花丝,因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成。
③培养条件
培养温度控制在25℃左右,不需要光照。幼小植株形成后才需要光照。
④培养时间、培养结果以及处理措施
一般经过20~30天培养后,会发现花药开裂,长出愈伤组织或释放出胚状体。将愈伤组织及时转移到分化培养基上,以便进一步分化出再生植株。如果花药开裂释放出胚状体,则一个花药内就会产生大量幼小植株,必须在花药开裂后尽快将幼小植株分开,分别移植到新的培养基上,否则这些植株将很难分开。
⑤鉴定和筛选
在花药培养中,特别是通过愈伤组织形成的花粉植株,常常会出现染色体倍性的变化。因此还需要对培养出来的植株作进一步的鉴定和筛选。
要点6 疑难解答
(1)为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难?
花瓣松动后,微生物就可能侵入到花药,给材料的消毒带来困难。
(2)植物组织培养技术与花药培养技术有何区别?
植物组织培养技术与花药培养技术的相同之处是:培养基配制方法、无菌技术及接种操作等基本相同。
两者的不同之处在于:花药培养的选材非常重要,需事先摸索时期适宜的花蕾;花药裂开后释放出的愈伤组织或胚状体也要及时更换培养基;花药培养对培养基配方的要求更为严格。这些都使花药培养的难度大为增加。
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